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為您分析elisa試劑盒定量與定性測試

更新時間:2021-04-21   點擊次數(shù):2265次
  ELISA試劑盒自從60-70年代問世以來,得到*科研工作者的認可及推崇,在歐美及中國獲得很大的推廣,尤其是國內(nèi)生化領域的長足發(fā)展。ELISA是以免疫學反應為基礎,將抗原牽9體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術由于抗原抗體的反應在一種固相載體聚苯Z烯微量滴定板的孔中進行,每加入-種試劑孵育后,可通過洗滌除去多余的游離反應物,從而保證試驗結果的特異性與穩(wěn)定性在實際應用中通過不同的設計具體的方法步驟可有多種.即用于檢測抗體的間接法用于檢測抗原的雙抗體夾心法以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法.
  一ELISA試劑盒定量測試
  ELSIA操作步驟復雜影響反應因素較多,特別是固相載體的包被難達到各個體之間的一致因此在定量測定中,每批測試均須用一系列不同濃度的參 考標準品在相同的條件下制作標準曲線測定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA,.標準曲線的范圍一般較寬,曲線點的吸光度可接近2.0,繪制時常用半對數(shù)紙以檢測物的濃度為橫坐標,以吸光度為縱坐標將各濃度的值逐點連接所得曲線一般呈S形其頭 尾部曲線趨于平坦中央較呈直線的部分是理想的檢測區(qū)域
  二ELISA試劑盒定性測試
  定性測定的結果判斷是對受檢標本中是否含有待測抗原或抗體作出”有"或"無"的簡單回答分別用"陽性" "陰性示:陽
  性"表示該標本在該測定系統(tǒng)中有反應:陰性則為無反應用定性判斷法也可得到半定量結果,即用滴度來表示反應的強度其
  實質(zhì)仍是一個定性試驗.在這種半定量 測定中將標本作-系列稀釋后進行試驗, 呈陽性反應的稀釋度即為滴度根據(jù)滴度的高低,可以判斷標本反應性的強弱,這比觀察不稀釋標本呈色的深淺判斷為強陽性弱陽性更具定量意義。
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